Ultracentrifugation
Publié le 11/02/2012
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Les progrès spectaculaires accomplis par la biologie moléculaire depuis 1950 résultent surtout de la mise au point de nouvelles techniques d'analyse, parmi lesquelles l'ultracentrifugation joue un rôle important. La centrifugation consiste à communiquer un mouvement de rotation rapide à la substance étudiée (généralement sous forme de solution). Sous l'action de la force centrifuge, les composants de la solution se différencient ou même se séparent selon leurs propriétés respectives (masse, forme, densité, etc.).
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varie progressivement de la surface vers le fond (gradient
de densité) .
4 L'ultracentrifugation est généralement exploitée selon
deux techniques.
La première utilise les
différences de masse entre particules et recourt à des systèmes optiques
compliqués pour suivre l'opération.
Cette méthode (déter mination de la vitesse de sédimentation) permet de carac tériser de nombreuses molécules et de vérifier avec une
extrême précision la pureté d'une solution de macro molécules ou d'organites.
5 La seconde méthode se fonde
sur les différences de densité entre particules.
Elle permet de détecter des
écarts de densité inférieurs au milligramme par cm•.
Elle
constitue de ce fait une bonne technique pour évaluer
le poids moléculaire des macromolécules biologiques.
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De 1950 à 1957, J'ultracentrifugation en gradient de
densité a permis Je fractionnement de nombreux consti tuants cellulaires dans tout Je règne vivant, depuis les
mammifères jusqu'aux virus.
On a pu notamment effectuer des séparations dé'licates là où d'autres procédés physico
chimiques s'avéraient impuissants.
De plus, la caractéri
sation de
plusieurs sortes d'ADN par différences de den sité a aidé à mettre en lumière le comportement physio logique de cette macromolécule..
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