chromatographie.

chromatographie. n.f., méthode d'analyse permettant d'isoler et de purifier les substances chimiques présentes au sein de mélanges complexes. Cette méthode fut élaborée au début du XX e siècle par le chimiste polonais M. S. Tsvett lors de ses études sur « le nombre et la nature des composantes de la chlorophylle «. De fait, la chromatographie doit son nom à son utilisation initiale dans la séparation des matières colorantes. Cette séparation met en jeu des phénomènes complexes et dépend d'un certain nombre de facteurs propres à chaque substance tels que la masse moléculaire, le caractère polaire ou non polaire, la possibilité de former des liaisons hydrogène, etc. Primitivement, la chromatographie fut réalisée sur carbonate de calcium pulvérisé, puis sur papier. Depuis lors, un grand nombre d'autres techniques se sont développées. Ces différentes techniques mettent en jeu trois types principaux de mécanismes chromatographiques : chromatographie par adsorption, chromatographie de partage et chromatographie par adsorption polaire ou par échange d'ions. La chromatographie par adsorption ou chromatographie liquide/solide est fondée sur les différences d'adsorption des substances par une phase solide stationnaire. Celle-ci est en général constituée par de la silice ou de l'alumine. La chromatographie par adsorption se réalise habituellement sur colonne. Le mélange à étudier est déposé en haut de la colonne, puis on procède à une élution par un solvant ou un mélange de solvants approprié. Les constituants du mélange se séparent en migrant vers le bas par ordre d'adsorption décroissante. Ils sont ensuite recueillis individuellement en sortie de colonne. La chromatographie de partage ou chromatographie liquide/liquide est basée sur les différences des coefficients de partage des divers constituants du mélange entre deux phases liquides. Pour des raisons de commodité, seule l'une des phases est mobile, l'autre étant immobilisée sur un gel. De façon pratique, la chromatographie de partage peut être réalisée sur papier, sur couche mince ou sur colonne. La chromatographie par échange d'ions est effectuée sur des résines échangeuses d'ions constituées par des polymères insolubles dans l'eau et porteurs de groupements acides ou basiques. Elle est notamment utilisée pour séparer les différents acides aminés des « hydrolysats « de protéines. S'ajoute à ces trois types de chromatographie la chromatographie liquide à haute performance, technique en plein développement aujourd'hui. Elle présente, par rapport aux techniques classiques, l'avantage d'être beaucoup plus rapide tout en ayant un pouvoir séparateur plus grand. L'utilisation combinée de phases stationnaires de granulométrie plus faibles et de la pression contribue grandement à son efficacité. Parmi les techniques de chromatographie également utilisées, il faut mentionner la chromatographie d'exclusion (ou de perméabilité de gel) dans laquelle les molécules sont séparées en fonction de leur taille. Cette méthode est généralement réservée aux substances de masses moléculaires élevées. La chromatographie en phase gazeuse est utilisée pour la séparation des substances volatiles. Elle met en jeu le partage entre une phase gazeuse mobile (substances à l'état de vapeurs entraînées par un gaz inerte) et une phase stationnaire (colonne) constituée généralement par un liquide non volatil réparti uniformément sur un solide inerte de grande surface spécifique. Complétez votre recherche en consultant : Les corrélats analyse - 1.CHIMIE fractionnement Les livres chromatographie, page 1099, volume 2