LA DIFFERENCIATION CELLULAIRE
Publié le 19/09/2012
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Identification des gènes par le clonage différentiel.
Le clonage différentiel consiste à reconnaître les cellules 10 T1/2 des cellules 10 T1/2
contenant de la 5 aza-cytidine (les 5 aza-myoblastes).
On réalise une extraction d’ARNm dans les cellules 10 T1/2 et dans les 5 aza-myoblastes.
Ces ARNm sont quasiment semblables : ceux des 5 aza-myoblastes possèdent seulement en plus les gènes de la différenciation musculaire.
A partir des ARNm, il est possible de synthétiser les ADNc (complémentaires).
Par hybridation différentielle, on fait s’associer les ADNc des 5 aza-myoblastes aux brins complémentaires d’ARNm des cellules 10 T1/2.
Certains ADNc vont s’hybrider et d’autres non.
Les ADNc non hybridés ne sont donc pas complémentaires des ARNm des cellules 10 T1/2.
Ils proviennent d’ARNm nouveaux qui se sont exprimés au cours de la différenciation : les ARNm spécifiques des 5 aza-myoblastes.
En clonant ces séquences non hybridées, on obtient des clones spécifiques de l’état myoblaste.
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